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                      公司新聞

                      環境監測CHCl?熏蒸提取法?

                      發布時間:2019-07-05 閱讀:93

                      概述:

                      微生物生物量氮指沉積物中體積<5000um^3微生物體內氮的總和(包括活的死的微生物體,不包括活體植物根系),是沉積物中有機氮中Z活躍的組分,化學組成大部分是蛋白質和多肽類物質,c/N值5-6。
                      微生物量氮一般占全氮含量的百分之一到百分之五,與沉積物水解性氮含量比較一致。沉積物微生物量氮是沉積物氮素轉化的重要環節,也是沉積物中有機-無機氮轉化關鍵的環節之一,含量可反映沉積物供氮能力的大小。
                      碳與氮含量的比值與沉積物中TOC/TN比值有顯著相關關系。研究其是評價微生物量和活性重要參數指標。相關研究主要測定了沉積物中微生物生物量氮的含量,可為進一步評價沉積物中微生物生物量氮生物有效性及其在沉積物氮循環中的作用提供科學依據。?方法原理:
                      沉積物樣品經過CHCl?熏蒸以后,礦化速率加快,能被0.5mol/LKCL提取的氮量明顯增加。假定熏蒸對非生物有機組分的礦化速率或可提取性的影響可以忽略,則根據熏蒸沉積物提取液中氨氮的增量可估算出沉積物微生物量氮的含量?設備與實驗條件

                      1)分析天平:精度0.0001g

                      2)紫外可見分光光度計

                      3)真空干燥器

                      4)真空泵

                      5)恒溫振蕩器

                      6)通風櫥

                      7)烘箱

                      試劑及操作步驟?試劑:
                      1)0.5mol/l的KCL:準確稱取氯化鉀37.275g溶于水中,稀釋至1L?2)酒石酸鉀鈉溶液?3)納氏試劑
                      4)銨標準儲備溶液:取3.8190g經100攝氏度干燥過的優級純氯化銨溶于水中,定容至1000ml(每毫升此溶液含1g氨氮)
                      5)銨標準使用溶液:5ml銨標準儲備液,定容至500ml(每毫升含0.01mg氨)?操作步驟
                      (1)標準曲線的制作
                      1)7支25ml的比色管,加入0,0.25,0.5,1.5,2.5,3.5,5.0ml銨標準使用液,加水定容10ml

                      再加入0.5ml酒石酸鉀鈉,0.75ml的納氏試劑,混勻定容25ml,十分鐘后在波長420nm處,以超純水為參比,測吸光度。由測得的吸光度減去零濃度空白吸光度后,得到校正吸光度,繪制以氨氮含量mg對校正吸光度的標準曲線。

                      (2)樣品測定?CHCl?熏蒸處理

                      在低溫下保存的沉積物樣品從冰箱中取出,室溫再稱取,稱取5g新鮮沉積物樣品到50ml的小燒杯中,置于真空干燥器內,干燥器底部預放一張濕潤粗濾紙保持濕度,真空干燥器內放置裝有CHCl?的小燒杯,燒杯內放置幾粒無水氯化鈣防止爆沸。少量凡士林密封干燥器,用真空泵抽氣至干燥器內CHCl?沸騰,關閉真空干燥器閥門,在25攝氏度暗處放24小時,熏蒸完成后,打開干燥器閥門,取出CHCl?燒杯,用真空泵反復抽真空,打開干燥器去除沉積物中殘留的CHCl?。
                      稱取同樣質量的一份樣品置于100ml離心管中,不熏蒸作為對照。?B.?KCL浸提
                      熏蒸結束后,用0.5mol/lkcl25ml將沉積物轉移到100ml離心管中,振蕩30min/(轉速200r/min,溫度25攝氏度)用混纖膜過濾,對照沉積物也同樣處理?C.?測定分析
                      取2.5ml上述浸提液于50ml的比色管中,定容到25ml,+0.5ml的酒石酸鉀鈉溶液,30秒后+0.75ml的納氏試劑搖勻后顯色十分鐘?D.?比色
                      超純水做參比,420nm測其吸光度(測樣時每側一個樣就用超純水沖洗2到三遍)要在45min內測完?注意點:
                      測定值受沉積物水分狀況影響很大,采用風干土,測定值顯著降低,熏蒸前濕潤沉積物則測定值增大;可以將沉積物樣品轉換成干樣計算。
                      直接應用文獻報道的轉換系數時注意沉積物性質及測定條件可比性?結果計算
                      沉積物微生物量氮含量的測定,根據測試指標帶入以下公式??????????B(mg/kg)=F/K
                      B微生物量氮?F熏蒸不熏蒸土壤提取液氨氮含量的差值;K轉換系數?0.45
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